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  • ISSN 1006-3080
  • CN 31-1691/TQ

重组谷胱甘肽-S-转移酶-肝素酶Ⅰ在大肠杆菌中的表达、纯化及其性质

张云康 高兴 汪德健 王富军 赵健

张云康, 高兴, 汪德健, 王富军, 赵健. 重组谷胱甘肽-S-转移酶-肝素酶Ⅰ在大肠杆菌中的表达、纯化及其性质[J]. 华东理工大学学报(自然科学版), 2011, (4): 458-463.
引用本文: 张云康, 高兴, 汪德健, 王富军, 赵健. 重组谷胱甘肽-S-转移酶-肝素酶Ⅰ在大肠杆菌中的表达、纯化及其性质[J]. 华东理工大学学报(自然科学版), 2011, (4): 458-463.
ZHANG Yun-kang, GAO Xing, WANG De-jian, WANG Fu-jun, ZHAO Jian. Expression, Purification and Characterization of Recombinant GST-haparinaseⅠ from Flavobacterium heparinum in Escherichia coli[J]. Journal of East China University of Science and Technology, 2011, (4): 458-463.
Citation: ZHANG Yun-kang, GAO Xing, WANG De-jian, WANG Fu-jun, ZHAO Jian. Expression, Purification and Characterization of Recombinant GST-haparinaseⅠ from Flavobacterium heparinum in Escherichia coli[J]. Journal of East China University of Science and Technology, 2011, (4): 458-463.

重组谷胱甘肽-S-转移酶-肝素酶Ⅰ在大肠杆菌中的表达、纯化及其性质

基金项目: 

上海市重点学科建设项目资助(B505)

Expression, Purification and Characterization of Recombinant GST-haparinaseⅠ from Flavobacterium heparinum in Escherichia coli

  • 摘要: 肝素酶Ⅰ(HeparinaseⅠ, HepⅠ)是一种多糖裂解酶,可特异性裂解硫酸肝素分子中糖苷键以制备低分子质量肝素(LMWH)。由于重组肝素酶Ⅰ在大肠杆菌中表达时极易形成包涵体,将肝素酶Ⅰ基因的N端融合谷胱甘肽-S-转移酶(GST)标签,在大肠杆菌中进行低温表达。结果显示,约90%的GST-HepⅠ融合蛋白以可溶性形式表达,表达的目标蛋白粗酶经过一步亲和纯化,比活为124.7 U/mg,纯化倍数达到366.7倍,酶活回收率为31.0%;结果表明Ca2+对重组GST-Hep Ⅰ有很强的激活作用,GPC-HPLC结果显示重组GST-Hep Ⅰ与天然肝素酶 Ⅰ 裂解图谱相同。

     

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出版历程
  • 收稿日期:  2011-02-28

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