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    尧辉, 魏东芝, 周宇荀, 沈立新, 刘寿春. 谷胱甘肽合成酶系基因协调表达体系的构建[J]. 华东理工大学学报(自然科学版), 2002, (2): 144-148.
    引用本文: 尧辉, 魏东芝, 周宇荀, 沈立新, 刘寿春. 谷胱甘肽合成酶系基因协调表达体系的构建[J]. 华东理工大学学报(自然科学版), 2002, (2): 144-148.
    Construction of Coordinated Expression System of gshI and gshIIGene for Improving the GSH Synthesis Capability of E.coli[J]. Journal of East China University of Science and Technology, 2002, (2): 144-148.
    Citation: Construction of Coordinated Expression System of gshI and gshIIGene for Improving the GSH Synthesis Capability of E.coli[J]. Journal of East China University of Science and Technology, 2002, (2): 144-148.

    谷胱甘肽合成酶系基因协调表达体系的构建

    Construction of Coordinated Expression System of gshI and gshIIGene for Improving the GSH Synthesis Capability of E.coli

    • 摘要: 通过 PCR获得 E.coli B谷胱甘肽合成酶系基因 ( gsh I,gsh II)片段 ,结合定点突变稀有起始密码子 ,设定 gsh I与 gsh II位置与距离 ,构建双顺反子重组表达载体 p Trc99A/gsh I- gsh II,建立GSHI、GSH- II蛋白表达体系。结果表明 :以 0 .0 8mmol/L IPTG于 2 8℃诱导工程菌 E.coli BL2 1( DE3) ( p Trc99A/gsh I- gsh II) ,GSH- I、GSH- II蛋白比为 4.5∶ 1 ( m∶ m)时谷胱甘肽合成能力最高 ,达到每克湿菌体 8.5 mg。通过构建单顺反子重组表达载体 p Trc99A/gsh I、p Trc99A/gsh II测定GSH- I与 GSH- II蛋白的最适配比 ,结果表明 :在 GSH- I、GSH- II蛋白总量恒定的情况下 ,要提高谷胱甘肽产率 ,两者比例以 3∶ 1~ 6∶ 1为宜

       

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