三苯甲基保护的巯烷臂寡核苷酸的合成及荧光标记
Synthesis of an Oligonucleotide Probe Containing Trityl-protected Sulphydryl Group and Tagging with a Fluorescent Dye
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摘要: 用三苯甲基巯基乙醇与氯化甲氧基吗啉亚磷酰胺连接得到一种亚磷酰胺试剂(Ⅲ)。用该试剂通过固相合成仪合成了5′末端巯烷基修饰的寡核苷酸,用Ag^ 脱去巯基的三苯甲基保护后与ω-碘已基修饰的荧光基因反应,得到相应的荧光标记寡核苷酸探针,设计的lmbH筛选探针与质粒DNA进行杂交,杂交结果验证了这种标记的实用性,灵敏度不达1pmol。